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酶標儀所用的單色光既可通過相干濾光片來獲得，也可用分光光度計相同的單色器來得到。在使用濾光片作濾波裝置時與普通比色計一樣，濾光片即可放在微孔板的前面，也可放在微孔板的后面，其效果是相同的。光源燈發出的光經聚光鏡，光欄后到達反射鏡，經反射鏡作90°反射后垂直通過比色溶液,然后再經濾光片送到光電管。

酶標儀是一種精密的光學儀器，因此良好的工作環境不僅能確保其準確性和穩定性，還能夠延長其使用壽命。根據DINVDE0871條例，儀器應放置在無磁場和干擾電壓的位置。依據DIN45635——19條例：儀器應放置在低于40分貝的環境下。為延緩光學部件的老化，應避免陽光直射。操作時環境溫度應在15℃——40℃之間，環境濕度在15%——85%之間。操作電壓應保持穩定，操作環境空氣清潔，避免水汽，煙塵，保持干燥、干凈、水平的工作臺面，以及足夠的操作空間。